连续流动分光光度法测定 NH4 + -N 主要根据靛 酚蓝反应的原理，连续流动分析技术测定植物中全 氮含量的结果与传统蒸馏滴定法的结果没有较大差 异，连续流动分析方法测试速度较快，样品交叉 污染小，广泛应用于农业、食品、环境监测等领域。土壤全氮采用凯氏法消煮，连续流动分 析仪测定还缺乏相应的研究，自动凯氏定氮仪测定 结果与连续流动分析仪测定结果之间关系还不甚清 楚。选择 50 个土壤样品和 2 个标准土壤样品用凯 氏法消煮，连续流动分析仪测定消煮液中的 NH4 + ， 结果与自动凯氏定氮仪测定结果相比较，以探讨连 续流动分析仪 - 靛酚蓝比色法，测定凯氏消煮液中 NH4 + 含量方法的可行性。
上海昕瑞自动凯氏定氮仪的蒸馏仪， 配置自动滴定仪型号：DL15，滴定管体积 20 mL，分 辨率 1/10 000，电极 DG115-SC，电位分辨率 0.1 mV。
试剂配制
（1）缓冲液：称取 35.8 g 磷 酸二氢钠，32.0 g 氢氧化钠，50.0 g 酒石酸钾钠于 600 mL 水中，定容至 1 000 mL；
（2）水杨酸钠溶 液：40.0 g 水 杨 酸 钠 溶 于 600 mL 蒸 馏 水， 加 入 1.0 g 硝普钠，稀释至 1 000 mL，混均存放于棕色试 剂瓶中；
（3）次氯酸钠溶液：将 3.0 mL 次氯酸钠 溶液（有效氯含量 8% ～ 10%）加入于 60 mL 蒸馏 水中，稀释至 100 mL，混合均匀，现用现配；
（4） 4% 硫酸溶液：移取 40.0 mL 浓硫酸稀释至 1 000 mL；
（5）硫酸铵储备液（N 1 000 mg/L）：准确称 取 4.717 g 硫酸铵（120℃烘干 2 h）溶于 600 mL 蒸 馏水中，搅拌溶解，混合均匀，定容至 1 000 mL。 1.4.2.2 参数设置 选择防酸进样针和高浓度进 样管，设置进样速率 50 个样 /h，进样与清洗比为 2.0∶1，进样时间 48 s，清洗时间 24 s。仪器默认设置基线和漂移校正，自动基线参比为 5%；比色
滤光片波长为 660 nm，灯强度大于 l 000 mV。样品消煮液中含氮量在连续流动分析仪线性测量范围（<N 50 mg/L）内，无需稀释。
土壤全氮
连续流动分析仪和自动凯氏定氮仪对 50 个土 壤样品的测定结果见图 3。连续流动分析仪测定的 土壤全氮范围为 0.68 ～ 2.06 g/kg，自动凯氏定氮仪 测定的全氮范围为 0.71 ～ 1.95 g/kg。
连续流动分析仪测定准确度
同上述连续流动分析仪测试条件，两个标准 土（河南黄潮土和江西红壤）凯氏法消煮、连续流 动分析仪测定消煮液中 NH4 + -N 含量，每个样品重 复消煮 7 次，评估连续流动分析仪测定全氮结果的 准确度。结果显示，连续流动分析仪测得 两个标准土相对标准偏差分别为 1.67% 和 3.09%， 河南黄潮土氮含量为 0.76 g/kg，在标准土确认值 （0.77±0.03）g/kg 范围内；江西红壤氮含量测定 值为 0.54 g/kg，介于江西红壤氮含量标准确认值 （0.54±0.04）g/kg 之间。因此，土壤全氮凯氏法消 煮 - 连续流动分析仪测定 NH4 + -N 含量方法准确度 较高。
与传统的全自动蒸馏滴定法相比，连续流 动分析仪包括自动进样系统、蠕动泵、化学分 析模块、比色系统和数据处理系统，能够实现 自动进样、自动分析检测。连续流动分析仪 测定土壤全氮过程中，消煮液、缓冲液、水杨 酸 钠、 次 氯 酸 钠 进 样 量 分 别 为 0.23、0.80（ 单 管 ）、0.23、0.23 mL/min。 显 示， 缓 冲 液 的 最大需求量为 1.60 mL/min。考虑到每天 8 ｈ工 作时间和其他因素，上述试剂每天用量分别为 110.4、768.0、110.4、110.4 mL，连续流动分析仪测定土壤全氮所用试剂量远小于自动蒸馏滴定技 术。试剂配制和仪器调试约需要 2 h，按照进样 速率 50 个 /h，一天可以测定 300 样次［6］。连续 流动分析仪测定 NH4 + -N 节省时间和人力，效率 较高。 95% 置信区间成对样品 T 检验结果显示，连 续流动分析仪测定土壤全氮和凯氏法测定土壤全 氮含量一致。 研究流动注射系 统（FIC 法）测定牛奶、鸡蛋和肉制品中凯氏氮 含量，结果显示 FIC 法测得结果和凯氏法测得结 果之间具有极显著线性相关，且方法检出限为 1 mg/L。本实验中连续流动分析仪测定 NH4 + -N 与 自动凯氏定氮仪测定 NH4 + -N 结果间具有显著线性 相关，回归方程为 y（连续流动分析仪 -NH4 + -N）= 0.995 1x（自动凯氏定氮仪 -NH4 + -N）+0.003 5 ，相 关系数 r=0.980，连续流动分析仪测定 NH4 + -N 检 出限为 0.128 mg/L。连续流动分析仪测定土壤全 氮的相对标准偏差均小于 5%，精密度较高，且 测定值均介于标准确认值范围内，测试结果较为准确。
连续流动分析仪测定土壤全氮能够克服传统方 法的缺点，相对标准偏差在 5% 以下，与全自动凯 氏蒸馏滴定法测定结果间无明显差异，连续流动分 析仪测定结果的准确度、精确度均较高。鉴于连续 流动分析仪法具有节省人力、节约试剂、提高工作 效率等优点，可适用于大批量土壤全氮含量的分析 测定。
