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上海昕瑞浊度计在大高良姜抑菌成分研究中的应
导读:上海昕瑞仪器仪表有限公司了解到本文研究大高良姜不同溶剂提取物对饲料微生物污染中常见的4种细菌和2种真菌体外抑菌活性的影响,通过正交试验优化乙醇回流提取工艺,测定提取
来源:未知
发布日期:2020-04-13 16:22【
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上海昕瑞仪器仪表有限公司了解到本文研究大高良姜不同溶剂提取物对饲料微生物污染中常见的4种细菌和2种真菌体外抑菌活性的影响,通过正交试验优化乙醇回流提取工艺,测定提取物的MIC、MBC以及对pH值、热和紫外光的稳定性,为进一步开发利用大高良姜资源提供依据。
1主要仪器
BPMJ-150F型恒温培养箱、DZF-6050型真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);WGZ-2XJ型浊度计(
上海昕瑞
仪器仪表有限公司);FE20K型pH计[梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司]。
2提取液及抑菌纸片制备
新鲜大高良姜除杂、洗净后切片,于55℃烘干后粉碎,粉末过80目筛,4℃保存备用。准确称取大高良姜粉末4.0g,按料液比1:10(m:V),分别以纯化水、无水乙醇、乙酸乙酯和石油醚为溶剂,60℃搅拌回流提取3h,抽滤除渣得各大高良姜提取液。提取液分别以0.22μm
天津津腾
无菌滤膜除菌,充分浸泡无菌空白药敏纸片3h,于55℃无菌条件下烘干,得各溶剂提取液的抑菌纸片。以各空白溶剂按上法制取阴性对照纸片。
3抑菌试验
(纸片扩散法)分别挑取各试验菌种单菌落至盛有适量灭菌生理盐水的试管中,以0.5号麦氏比浊管为参比调整菌悬液至相同浊度。用灭菌棉签沾取少量菌悬液,于平板(细菌使用水解酪蛋白琼脂培养基,真菌使用葡萄糖美兰水解酪蛋白琼脂培养基)上进行涂布。待涂布稍干后贴片,以各空白溶剂纸片为阴性对照,庆大霉素(细菌)和伏立康唑(真菌)药敏纸片为阳性对照。贴片完毕,细菌和真菌平板分别置于37℃和28℃恒温培养18h和36h,用游标卡尺以十字交叉法测量抑菌圈直径,每组试验重复三次。
中草药具有绿色、安全、低残留、不易产生耐药性等优势,是一种前景良好的绿色饲料添加剂。本文采用抑菌圈法测定大高良姜不同溶剂提取物对饲料微生物污染中常见的4种细菌和2种真菌的体外抑菌活性,确定了乙醇为最佳提取溶剂。以试验菌中抑菌活性较好的金黄色葡萄球菌和黑曲霉为指示菌,通过正交试验优化提取工艺;在最佳提取条件下所得的大高良姜提取物对金黄色葡萄球菌和黑曲霉的抑菌圈分别为25.02mm和22.74mm,优于阳性对照药物的抑菌效果,显示出良好的抑菌活性;最小抑菌浓度均为0.313mg/ml,最小杀菌浓度分别为1.25mg/ml和0.625mg/ml,具有作为一种绿色天然抑菌剂的潜力。目前,国内关于高良姜活性成分抑菌作用的文献较多,但对其同属植物大高良姜提取物抑菌活性的研究尚未见报道,本文为开发利用大高良姜资源和研究大高良姜的抑菌成分提供理论依据。
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